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# De la biopsia a la lámina: fijación, corte y biopsia por congelación

- Técnica

Antes de mirar un tejido al microscopio hay que conservarlo, endurecerlo, cortarlo muy fino y teñirlo.

Actualizado 2026-11-01

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## Lo esencial

- Orden: fijar, deshidratar, aclarar, incluir en parafina, cortar, teñir.
- El formol entrecruza proteínas; el glutaraldehído se prefiere para microscopía electrónica.
- Congelación = rápido (minutos), menos detalle, conserva lípidos; parafina = días, mejor detalle.
- Los espacios vacíos en un corte de rutina suelen ser lípidos o mucina disueltos, no aire.

## Qué es

El procesamiento histológico convierte una muestra blanda y perecedera en láminas finas y estables. La técnica de rutina usa fijación en formol e inclusión en parafina y da el mejor detalle, pero tarda días; la biopsia por congelación da una respuesta en minutos durante la cirugía, con menos detalle.

## Paso a paso

- Toma de la muestra (biopsia o pieza quirúrgica) y envío rápido al laboratorio para evitar la autólisis.
- Fijación, casi siempre en formol tamponado: entrecruza las proteínas y detiene la autodigestión.
- Deshidratación en alcoholes de concentración creciente.
- Aclaramiento con un solvente (xilol) que es miscible con la parafina.
- Inclusión en parafina fundida para formar un bloque que se puede cortar.
- Corte con el micrótomo en secciones de pocas micras y montaje en un portaobjetos.
- Desparafinado, tinción (H-E u otras) y montaje con cubreobjetos para el estudio del patólogo.

## Corte en parafina frente a corte por congelación

| Rasgo | Parafina (definitivo) | Congelación (intraoperatorio) |
| --- | --- | --- |
| Tiempo | Varios días | Unos 15 a 20 minutos |
| Instrumento | Micrótomo | Criostato |
| Detalle | El mejor; es la base del diagnóstico final | Menor; artefactos por cristales de hielo |
| Lípidos | Se disuelven (los adipocitos se ven vacíos) | Se conservan (útil para tinciones de grasa) |
| Uso típico | Diagnóstico definitivo, inmunohistoquímica, archivo | Márgenes quirúrgicos, decidir la extensión de la cirugía, inmunofluorescencia |

## Correlación clínica

- La biopsia por congelación se usa para saber en el quirófano si un margen está libre de tumor o si un ganglio tiene metástasis.
- Una fijación tardía o insuficiente daña la morfología y puede alterar la inmunohistoquímica (por ejemplo, receptores hormonales en cáncer de mama).
- Las biopsias de piel con sospecha de enfermedad ampollosa autoinmune se envían también sin formol para inmunofluorescencia directa.

## Para recordar

«Fija, seca, aclara, encera, corta, colorea»: seis verbos que llevan el tejido de la mesa quirúrgica a la lámina.

## Póngase a prueba

Piense la respuesta y toque la pregunta para verla.

## ¿Cuál es la función principal del formol en el procesamiento histológico?

Fijar el tejido: entrecruza las proteínas, detiene la autólisis y conserva la arquitectura.

## ¿Para qué se usa una biopsia por congelación durante una cirugía?

Para obtener un diagnóstico rápido, por ejemplo si un margen quirúrgico está comprometido, en unos 15 a 20 minutos.

## ¿Por qué los adipocitos se ven como espacios vacíos en un corte de parafina?

Porque los alcoholes y el xilol del procesamiento disuelven los lípidos; queda solo la membrana y el núcleo desplazado.

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Fuentes: [Tissue preparation 1](https://digitalhistology.org/histology-basics/tissue-preparation/tissue-1/) (Digital Histology, 2024); [Pathology Reports](https://www.cancer.gov/about-cancer/diagnosis-staging/diagnosis/pathology-reports-fact-sheet) (National Cancer Institute, 2024).

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