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# ELISA, western blot y pruebas rápidas

- Tema

El ELISA usa una enzima que produce color cuando un anticuerpo se une a su blanco. Es la base de muchas pruebas de tamizaje, como las del VIH.

Actualizado 2026-11-01

## Lo esencial

- ELISA = tamizaje sensible; un positivo siempre se confirma.
- Cuarta generación: anticuerpos + antígeno p24.
- Algoritmo VIH: Ag/Ac → diferenciación VIH-1/VIH-2 → ácido nucleico si hay discordancia.
- Western blot: anticuerpos contra proteínas separadas por tamaño; ya no es el confirmatorio estándar del VIH.
- Menores de 18 meses: diagnóstico del VIH con pruebas del virus.

## Qué es

El ELISA (ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas) fija un antígeno o un anticuerpo a una superficie, deja reaccionar la muestra y revela la unión con un anticuerpo marcado con una enzima que cambia de color un sustrato; el color es proporcional a lo que se busca. El western blot separa las proteínas por tamaño y muestra contra cuáles hay anticuerpos, banda por banda. Las pruebas rápidas aplican el mismo principio en una tira de flujo lateral.

## Datos clave

- ELISA directo o de captura detecta antígeno; ELISA indirecto detecta anticuerpos; en el competitivo, más analito da menos color.
- El ELISA es muy sensible: ideal para tamizar; su valor predictivo positivo baja cuando la prevalencia es baja.
- Western blot: electroforesis de las proteínas virales, transferencia a una membrana y detección de anticuerpos contra cada banda (p24, gp41, gp120/160 en el VIH).
- Las pruebas de cuarta generación del VIH detectan anticuerpos y el antígeno p24, lo que acorta el periodo de ventana.

## Paso a paso

- ELISA indirecto: el pozo viene recubierto con el antígeno del microbio.
- Se agrega el suero; si tiene anticuerpos específicos, se unen al antígeno.
- Se lava para retirar lo que no se unió.
- Se agrega un anticuerpo antihumano marcado con una enzima.
- Se lava de nuevo y se añade el sustrato: la enzima produce color.
- Un lector mide la densidad óptica y la compara con un punto de corte.

## En el laboratorio

- Algoritmo actual del VIH en laboratorio (CDC): 1) inmunoensayo de antígeno-anticuerpo; 2) si es reactivo, inmunoensayo que diferencia VIH-1 de VIH-2; 3) si este es negativo o indeterminado, prueba de ácido nucleico (carga viral cualitativa).
- Prueba de ácido nucleico positiva con diferenciación negativa = infección aguda por VIH-1.
- El western blot salió del algoritmo de los CDC: es menos sensible en la infección temprana y no distingue bien el VIH-2.
- En muchos lugares sin laboratorio se diagnostica con dos o tres pruebas rápidas distintas en secuencia, según la estrategia nacional.
- Ventana aproximada: anticuerpos 23 a 90 días; antígeno-anticuerpo en laboratorio 18 a 45 días; ácido nucleico 10 a 33 días.

## Para recordar

ELISA «avisa», el blot «detalla» y el ácido nucleico «encuentra al virus en persona».

## Póngase a prueba

Piense la respuesta y toque la pregunta para verla.

## ¿Qué detectan las pruebas de VIH de cuarta generación?

Anticuerpos contra VIH-1 y VIH-2 y el antígeno p24, por lo que detectan la infección antes que las pruebas solo de anticuerpos.

## En el algoritmo de laboratorio actual, ¿qué se hace si el inmunoensayo inicial es reactivo y la prueba de diferenciación es negativa?

Se hace una prueba de ácido nucleico del VIH-1; si es positiva, indica infección aguda.

## ¿Qué muestra un western blot?

Contra qué proteínas, separadas por tamaño en una membrana, tiene anticuerpos el suero; cada proteína aparece como una banda.

## ¿Por qué un ELISA positivo en una población de baja prevalencia necesita confirmación?

Porque, aunque la especificidad sea alta, con baja prevalencia una parte importante de los positivos son falsos positivos (bajo valor predictivo positivo).

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Contenido educativo sobre el sistema inmune; no es una guía de tratamiento ni de vacunación individual y no reemplaza la indicación de un profesional de la salud. No incluye dosis.

Fuentes: [Suggested Reporting Language for the HIV Laboratory Diagnostic Testing Algorithm](https://stacks.cdc.gov/view/cdc/22423) (Centers for Disease Control and Prevention (CDC) and APHL, 2013); [HIV Screening Test](https://medlineplus.gov/lab-tests/hiv-screening-test/) (MedlinePlus (U.S. National Library of Medicine), 2024); [ENZYME LINKED IMMUNOSORBENT ASSAYS REVISITED](https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC5530809/) (Medical Journal Armed Forces India (PubMed Central), 1997); [Latex agglutination test](https://medlineplus.gov/ency/article/003334.htm) (MedlinePlus (U.S. National Library of Medicine), 2024).

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