Bioquímica · Tema
Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) !
La PCR copia millones de veces un fragmento concreto de ADN en pocas horas; es la base del diagnóstico molecular de infecciones y enfermedades genéticas.
Actualizado 2026-11-01
Datos clave
- Ingredientes: ADN molde, dos cebadores (primers) que flanquean la región, los cuatro dNTP, Mg²⁺ y una ADN polimerasa termoestable (Taq, de Thermus aquaticus).
- Cada ciclo tiene tres pasos: desnaturalización (~95 °C), hibridación de cebadores (~50–65 °C) y extensión (~72 °C).
- Crecimiento exponencial: unos 30 ciclos dan del orden de mil millones de copias (2³⁰).
- RT-PCR: primero se copia ARN en ADNc con transcriptasa inversa (virus de ARN, expresión de genes).
- PCR en tiempo real (qPCR): una sonda o colorante fluorescente mide el producto en cada ciclo; menos ciclos para positivizar = más carga inicial.
En detalle
- La especificidad la dan los cebadores: unos 18–25 nucleótidos complementarios a los extremos de la región que se quiere amplificar.
- El producto se ve por electroforesis en gel de agarosa: las bandas se separan por tamaño y se tiñen con un colorante que se une al ADN.
- El valor Ct (ciclo umbral) de la qPCR es inversamente proporcional a la cantidad de molde inicial; así se mide la carga viral.
- Variantes: PCR multiplex (varios blancos a la vez), PCR digital (cuenta moléculas una a una), PCR alelo específica (detecta una mutación puntual).
- Problemas: contaminación con ADN amplificado previamente (falsos positivos) e inhibidores en la muestra (falsos negativos); por eso se usan controles positivos, negativos e internos.
- También llamado
- PCR, RT-PCR, qPCR
Correlación clínica
- Carga viral de VIH, hepatitis B y C; diagnóstico de dengue, COVID-19 y otras infecciones por RT-PCR.
- Detección rápida de Mycobacterium tuberculosis y de su resistencia a rifampicina (mutaciones en rpoB) con pruebas moleculares automatizadas.
- Diagnóstico genético: mutaciones puntuales, deleciones (Duchenne), expansiones de repetidos (X frágil, Huntington), identificación forense y pruebas de paternidad.
Enfermedades relacionadas
Relacionadas
- ADN polimerasas
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Póngase a prueba
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¿Por qué la PCR necesita una ADN polimerasa termoestable?
Cada ciclo calienta a unos 95 °C para separar las cadenas; una polimerasa común se desnaturalizaría.
¿Qué paso adicional tiene la RT-PCR y para qué sirve?
Una transcripción inversa previa que copia ARN en ADNc; permite detectar virus de ARN o medir la expresión de un gen.
En una qPCR, ¿qué indica un valor Ct bajo?
Mucho molde al inicio: el producto cruza el umbral de fluorescencia en pocos ciclos (por ejemplo, carga viral alta).
Información educativa, no es consejo médico. Ante un síntoma, consulte a un profesional de la salud.
Fuentes: Polymerase Chain Reaction (PCR) Fact Sheet (National Human Genome Research Institute (NHGRI), 2026); Polymerase Chain Reaction (PCR) (National Human Genome Research Institute (NHGRI), 2026); HIV Viral Load: MedlinePlus Medical Test (MedlinePlus, US National Library of Medicine, 2026); Textbook of Biochemistry for Medical Students, 6th ed. (Jaypee Brothers Medical Publishers (Vasudevan DM, Sreekumari S, Vaidyanathan K), 2011).
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