Bioquímica · Tema
ADN recombinante y clonación !
La tecnología de ADN recombinante corta y une ADN de distintos orígenes para que una célula huésped fabrique una proteína o copie un gen.
Actualizado 2026-11-01
Datos clave
- Enzimas de restricción: cortan secuencias palindrómicas específicas (ej. EcoRI, GAATTC), dejando extremos cohesivos o romos.
- La ADN ligasa une el fragmento al vector (plásmido o virus).
- El plásmido lleva un origen de replicación, un gen de resistencia a antibiótico (selección) y un sitio de clonación múltiple.
- El ADNc se obtiene del ARNm con transcriptasa inversa: no tiene intrones y por eso las bacterias pueden expresarlo.
- Productos clásicos: insulina humana, hormona de crecimiento, eritropoyetina, factor VIII, vacuna de hepatitis B.
En detalle
- 1. Obtener el gen: por PCR, a partir de ADNc o por síntesis química.
- 2. Cortar el gen y el vector con la misma enzima de restricción para que sus extremos encajen.
- 3. Unir con ADN ligasa y introducir el vector en la célula huésped (transformación en bacterias, transfección en células animales).
- 4. Seleccionar las células que lo recibieron con el antibiótico; el cribado azul/blanco (lacZ interrumpido) identifica las que llevan inserto.
- 5. Expresar la proteína: bacterias (barato, sin glucosilación), levaduras o células de mamífero (glucosilación humana, como la eritropoyetina).
- Polimorfismos de longitud de fragmentos de restricción (RFLP): una mutación que crea o destruye un sitio de corte cambia el tamaño de los fragmentos; base del diagnóstico molecular clásico de la anemia falciforme.
Correlación clínica
- La insulina humana recombinante reemplazó a la de origen animal y redujo las reacciones inmunes.
- Los animales transgénicos y knockout permiten estudiar enfermedades humanas en el laboratorio.
Enfermedades relacionadas
Relacionadas
- Reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
- Secuenciación del ADN
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- CRISPR-Cas9 y edición del genoma
- Operón lac y regulación génica en bacterias
Póngase a prueba
Piense la respuesta y toque la pregunta para verla.
¿Por qué se clona ADNc y no ADN genómico para expresar una proteína humana en bacterias?
Las bacterias no hacen splicing; el ADNc, copiado del ARNm maduro, ya no tiene intrones.
¿Qué tipo de secuencia reconocen las enzimas de restricción?
Secuencias cortas palindrómicas (se leen igual 5'→3' en ambas cadenas), como GAATTC para EcoRI.
¿Para qué lleva el plásmido un gen de resistencia a antibiótico?
Para seleccionar: solo las bacterias que recibieron el plásmido sobreviven en el medio con antibiótico.
Información educativa, no es consejo médico. Ante un síntoma, consulte a un profesional de la salud.
Fuentes: Recombinant DNA Technology (National Human Genome Research Institute (NHGRI), 2026); Restriction Enzyme (National Human Genome Research Institute (NHGRI), 2026); Textbook of Biochemistry for Medical Students, 6th ed. (Jaypee Brothers Medical Publishers (Vasudevan DM, Sreekumari S, Vaidyanathan K), 2011).
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